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幹細胞移植技術為肝硬化患者打開希望之門!

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肝硬化是臨床常見病,是各種慢性病因導致肝細胞壞死、纖維組織增生、結構破壞形成假小葉、質地變硬的疾病。其治療重點在於如何有效促進肝細胞再生並代替纖維組織。

研究發現,在各種原因導致的肝細胞急慢性損傷及修複的過程中,肝細胞的再生起重要作用,而骨髓源性幹細胞(bone marrow stem cell, BMSC)是肝細胞的重要肝外來源。骨髓幹細胞在特定環境下可分化成肝幹細胞及肝細胞,從而參與肝結構和功 能的修複和重構網。

香蕉成视频人app下载的研究采用患者自體骨髓源性幹細胞作為供體,體外分離後純化經肝動脈途徑移植入患者肝內,使幹細胞在肝髒中分化生長為具有功能的肝細胞,使肝硬化患者的肝功能得到恢複。


臨床病例40例

沈陽軍區總醫院消化內科,香蕉成视频人app下载選擇肝硬化失代償期患者40例,其中肝炎後肝硬化29例,酒精性肝病10例,血吸蟲性肝硬化1例,在體外分離純化骨髓源性幹細胞並製成10 ml細胞懸液,經肝動脈將上述10 ml細胞懸液移植入肝髒,分別在移植後第第2、4、8周複査肝髒功能,觀察實驗室指標,臨床症狀及不良反應情況。

結果:移植後第4周,血漿白蛋白明顯升高,總膽紅素水平在移植前後無顯著性變化。上述結果表明骨髓幹細胞移植後,患者肝髒功能明顯改善,但黃疸指標變化不顯著。幹細胞移植後4周,凝血 酶原時間(PT)逐漸下降,由術前(17.81±4.39)s降至(16.36 ±4.11)s,纖維蛋白原逐漸升高,由術前(2.02 ± 0.96)g/L升至(2.36 士 0.89)g/L;表明骨髓幹細胞移植治療後患者凝血機製明顯改善。

幹細胞移植對肝硬化失代償期患者生存質量的影響:食欲改善、體力好轉37例(92.5%),腹脹減輕33例(82.5%),腹水減少、下肢浮腫減輕35例(87,5%)。在全部40例患者中術中未發生嚴重並發症,術後近期無不良反應出現。結論自體骨髓幹細胞移植治療可使失代償期肝硬化患者肝功能明顯改善,治療安全有效且副作用小,可作為中晚期肝硬化患者的臨床治療方案。


對象和方法

1病例選擇

香蕉成视频人app污破解版選擇了 2007年5月~ 2007年12月在沈陽軍區總醫院消化內科住院患者40例,其中女性 11例,男性29例,年齡26 ~67歲,平均年齡46歲, 其中肝炎後肝硬化29例,酒精性肝硬化10例,血吸 蟲性肝硬化1例,肝功能Child B級19例,Child C 級21例。40例患者術前均存在肝硬化常見症狀和體征,包括納差、乏力、腹脹,同時經腹部B超或腹 部CT檢查明確診斷肝硬化並合並腹水,術前實驗 室檢查包括血清穀丙轉氨酶(ALT)、穀草轉氨酶 (AST)、總膽紅素(TBIL)、血漿白蛋白(ALB)、凝血 酶原時間(PT)、纖維蛋白原(FIB),部分患者還檢測 了血氨、甲胎蛋白及血脂。患者入院後均行內科對症治療,包括保肝、利尿及必要時腹水回輸等。所有 治療在患者知情同意情況下進行,簽署《知情同意書》。


2術前準備

移植前2 d給予患者集落細胞刺激因子皮下注射,連續2d;術前Id行碘過敏實驗、雙側腹股溝備皮,術前4h禁食禁水,移植當日對患者進行隔離,骨髓穿刺術前5~10h進行房間消毒。


3骨髓幹細胞采集及分離

取骼後上棘為穿刺點,局部麻醉消毒,在無菌條 件下,以18號骨髓穿刺針穿刺,抽取骨髓150 ~ 200 ml,以7500 U肝素抗凝,然後采用負篩選法進行骨髓幹細胞的體外分離及純化,得到的單個核細胞計 數3.6 x 10^8/ml ~1.8 x 10^11/ml,采用流式細胞儀檢測 CD34+幹細胞數為10^6/ml ~ 10^9/ml,4℃冰箱存放,時間不超過3h。


4移植方法

在DSA下經股動脈穿刺插管,置管於肝固有動脈進行造影,觀察肝內血管情況及有無占位性病變。將待用的細胞懸液10 ml於3 h內經左右肝動脈緩慢注入;術畢拔管,穿刺點加壓包紮後返回病房,穿刺側下肢製動6 h。


5療效觀察

術後觀察指標包括3部分:—是患者臨床症狀、 體征;二是複查前述實驗室指標;三是複査影像學檢查。術後住院期間及出院後的觀察期所選擇的病例 均未使用保肝藥物及輸注人血白蛋白等。術後2、4、 8 周分別複查 ALT、AST、TBIL、PT、FIB 及 ALB 等 指標,術後8周複查肝髒B超或CT。根據臨床症 狀、體征和實驗室檢查結果,初步將患者療效分為:有效(臨床症狀有1項以上減輕,體征有1項以上改善,實驗室檢查指標2項以上好轉);無效(臨床症狀 和體征沒有改善,實驗室檢查指標無好轉嚴。


6統計方法

數據以均數±標準差(x拔 ± s)表示,同一病人治療前後比較釆用配對t檢驗,用SPSS13.0軟件分析。


結果

1肝功能改變

患者在幹細胞移植後第2周實驗室指標開始出 現變化,至第4周多項指標出現顯著變化(見表1), 其中ALB較術前顯著升高(P<0.01);ALT.AST 較術前顯著降低(P<0.05),TBIL較術前也有所降低,但無統計學意義。


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2凝血機製改變

凝血酶原時間(PT)較術前下降,P <0.05;纖維 蛋白原(FIB)較術前上升,P<0.01 ;提示移植前後凝血機製有顯著改善。


3臨床症狀及體征

自體骨髓幹細胞移植後第4周開始大多數患者 臨床症狀、體征明顯改善,其中腹水減少及下肢浮腫 減輕35例(87.5% );食欲改善、體力好轉37例 (92.5%);腹脹減輕 33 例(82.5%)。


4不良反應

40例移植患者中未發現嚴重不良反應及並發症,術後低熱及輕度惡心各1例,24h內自行緩解。無感染、肝區疼痛、出血等並發症。


結論

肝硬化為臨床常見病,一直以來缺乏有效的治療手段。原位肝移植是目前比較根本有效的治療方法,但受限於供體肝的缺乏、移植後的免疫排斥反應 及高額治療費用而難以普遍開展。肝細胞移植 (Hepatocyte transplantation)和人工肝作為原位肝移 植的替代治療,同樣存在上述問題。在肝損傷及肝 細胞再生過程中,幹細胞起重要作用。自體骨髓源性幹細胞移植以其特有的優勢,給肝硬化的治療帶來了美好的前景。

幹細胞是一類具有自我更新和分化能力的細 胞,在一定的環境下可分化為多種功能細胞。用於治 療肝硬化的幹細胞根據其起源的不同,可分為肝源 性肝幹細胞和非肝源性肝幹細胞,後者包括骨髓源 性幹細胞、胰腺上皮細胞及神經幹細胞等,其中骨髓源性幹細胞又包括造血幹細胞、間充質幹細胞及骨 髓幹細胞。不同來源的肝幹細胞雖然在形態、表麵 標誌、功能及分化等諸方麵有所差異,但均具有多向 性演變的特性氣大量研究顯示,在人肝硬化進展期 過程中,肝細胞因端粒縮短導致肝細胞複製活動消失,此時產生於骨髓造血幹細胞的卵圓細胞是肝細胞再生的主要來源,人的肝細胞和膽管細胞可由骨 髓幹細胞遷移並分化生成,如此可補充大量的肝細 胞和膽管細胞網。骨髓源性幹細胞誘導產生肝細胞 的機製包括通過細胞融合的方式產生四倍體、六倍 體和非整倍體肝細胞;另外,骨髓造血幹細胞還可能 通過啟動快速高效的內源性肝細胞的增殖途徑,進 而改善內源性肝細胞的損傷。

也有大量研究表明,骨髓源性幹細胞經誘導後產生的肝細胞是可以很好地替代受損肝細胞,進而 恢複肝髒的功能。經集落細胞刺激因子預處理的骨髓造血幹細胞注入受損的肝髒後,可在肝髒動脈中發現很高比例的骨髓源性的肝細胞,提示某些刺激因子的介入加速了骨髓對肝細胞的誘導過程。由此, 在人幹細胞提取純化過程中選擇合適的誘導劑,比如集落細胞刺激因子,可促進骨髓幹細胞移植後向 肝細胞的誘導分化。

為探索骨髓源性幹細胞對肝硬化病人的治療作 用,香蕉成视频人app免费播放器在臨床上開展了自體骨髓源性幹細胞經肝 動脈移植治療失代償期肝硬化的研究。本研究發現, 自移植後第2周實驗室指標出現變化,至移植後第 4周,所有40例患者血清白蛋白水平均明顯升高, 是化驗指標中最為顯著的變化;其次是纖維蛋白原水平和凝血酶原時間均較術前顯著改善;ALT、AST 於術後第4周亦出現明顯下降。然而,血清總膽紅 素水平雖有下降,但無統計學意義。上述結果表明,骨髓幹細胞移植治療後,患者肝髒功能明顯改善,尤 其以肝髒的合成及修複功能改善為顯著。這些變化 特別是血清白蛋白的升高是一般護肝治療不可能達 到的。失代償期肝硬化屬難治性疾病,故未設對照 組,其結果也是可信的。另外,香蕉成视频人app下载還觀察到移植後 大多數患者的臨床症狀明顯改善。在40例移植患 者中未發現嚴重不良反應及並發症。

我國是肝病大國,各種原因導致的肝硬化患者眾多。在藥物及原位肝移植治療之外,自體骨髓源 性幹細胞移植治療失代償期肝硬化是一種全新而有效的新方法。其雖不能給肝病患者帶來治愈性的效 果,但是可以在很大程度上控製肝硬化的進展速度,提高肝硬化患者的生存質量。

香蕉成视频人app免费播放器在本研究中采用的幹細胞類型、選擇的移植途徑、使用的細胞數量均已在臨床應用中得到有效證實,但仍有許多問題需要研究和思考,如骨髓源性幹細胞中是否須進一步鑒別及純化;分離純化後的幹細胞如果經過體外擴增後能否進一步提高療效;幹細胞經肝動脈途徑移植與經門靜脈途徑、經脾途徑、經外周靜脈途徑及肝組織局部注射途徑移植的優勢對比;此外幹細胞的 數量及移植手術次數對臨床療效果有何影響,均是香蕉成视频人app免费播放器下一步研究中需要進一步觀察和解決的問題。


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